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大鼠正五聚蛋白-3（PTX3）elisa指標(biāo)檢測(cè)試劑盒（北京elisa實(shí)驗(yàn)原理）

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    2013年07月08日
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elisa試劑,酶聯(lián)免疫,elisa現(xiàn)貨,elisa代測(cè)
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資料簡(jiǎn)介

大鼠正五聚蛋白-3（PTX3）elisa指標(biāo)檢測(cè)試劑盒（北京elisa實(shí)驗(yàn)原理）
檢測(cè)范圍：                                                                                                 
0.15µg/L -5µg/L 
使用目的： ：： ：
本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中五聚素-3（PTX3）含量,。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠五聚素-3（PTX3）水平,。用純化的大鼠五
聚素-3（PTX3）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入五聚素-3
（PTX3），再與 HRP 標(biāo)記的五聚素-3 （PTX3）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，
經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下
轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的五聚素-3 （PTX3）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm
波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值）,，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠五聚素-3（PTX3）濃度,。
試劑盒組成
1  30 倍濃縮洗滌液  20ml×1 瓶  7  終止液  6ml×1 瓶
2  酶標(biāo)試劑  6ml×1 瓶  8  標(biāo)準(zhǔn)品（9.6µg/L）  0.5ml×1 瓶
3  酶標(biāo)包被板  12 孔×8 條  9  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液  1.5ml×1 瓶
4  樣品稀釋液  6ml×1 瓶  10  說(shuō)明書(shū)  1 份
5  顯色劑 A 液  6ml×1 瓶  11  封板膜  2 張 
6  顯色劑 B 液  6ml×1/瓶  12  密封袋1 個(gè)
 
大鼠正五聚蛋白-3（PTX3）elisa指標(biāo)檢測(cè)試劑盒（北京elisa實(shí)驗(yàn)原理）
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,，因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋,。
4.8µg/L  5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.4µg/L  4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.2µg/L  3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0.6µg/L  2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0.3µg/L  1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.  加樣：分別設(shè)空白孔 （空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,，
然后再加待測(cè)樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡
量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.  溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.  配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.  洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次,，拍干,。
6.  加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外,。
7.  溫育：操作同 3,。
8.  洗滌：操作同 5,。
9.  顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色
10 分鐘.
10.  終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11.  測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）,。  測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
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