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大鼠一氧化氮合成酶(NOS)elisa指標檢測試劑盒(北京elisa實驗原理)

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    2013年07月08日
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大鼠一氧化氮合成酶(NOS)elisa指標檢測試劑盒(北京elisa實驗原理)

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被大鼠一氧化氮合成酶(NOS)獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的大鼠一氧化氮合成酶(NOS)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。

大鼠一氧化氮合成酶(NOS)elisa指標檢測試劑盒(北京elisa實驗原理)

1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
大鼠一氧化氮合成酶(NOS)elisa指標檢測試劑盒(北京elisa實驗原理)注意事項
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,,實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,。
2、酶標包被板開封后如未用完,,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。
3,、建議所有的標準品,、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差,。
4,、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度,。
5,、本試劑盒定量范圍為1.5-48μmol/L,超過此范圍,,為標準曲線延伸計算所得,,不做為準確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結(jié)果(1.5-48μmol/L范圍內(nèi)),,乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度,。
6、若顯色過淺,,可適當(dāng)延長底物溫育時間,。
7、為避免交叉污染,,標準品,、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液,、樣本稀釋液和底物等公共組分,,要懸臂加樣,不得碰到微孔,;不得重復(fù)使用封板膜,。
8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,,不同批號的試劑不得混用,。
9、底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。

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